УДК 638.15-084
На основании многолетних эпизоотологических исследований нами установлено, что бесконтрольная продажа пакетов пчел и маток, а также широкое распространение варроатоза привели к вспышке целого ряда вирусных заболеваний, таких как вирус острого паралича, вирус деформации крыла и особенно вирус мешотчатого расплода.
Проведенные нами исследования заболевших семей пчел показали, что доля вирусных заболеваний достигает 20%.
Для вируса мешотчатого расплода характерно: наличие мозаичного (пестрого) расплода; обнаружение при вскрытии запечатанного расплода личинок, напоминающих мешочек, содержащий жидкость; засушенные предкуколки темно-коричневого или черного цвета, лежащие выпуклой стороной к стенке ячейки в виде полулунных «корочек».
Вирус мешотчатого расплода чаще поражает личинки в возрасте не старше 2 дней, далее они менее восприимчивы. Заражение молодых рабочих пчел происходит в процессе работы по очистке улья, когда они удаляют из ячеек погибших личинок, содержащих жидкость с вирусными частицами.
Уже через 1 день после заражения в гипофарингеальной железе пчелы отмечают значительное количество вирусных частиц. Когда зараженные особи становятся кормилицами, они передают вирус расплоду вместе с личиночным кормом. Свежая пыльца, собранная зараженными пчелами-сборщицами, также является источником инфекции.
Несмотря на то что взрослые пчелы не проявляют явных клинических признаков заражения, они собирают меньшее количество пыльцы, чем здоровые, продолжительность их жизни сокращается. В течение зимы вирус сохраняется во взрослых особях, а весной происходит вспышка болезни.
Для диагностики вирусных заболеваний пчел в настоящее время применяют целый спектр различных методов: реакция иммунодиффузии [1], иммуноферментный анализ (ИФА или согласно англоязычному обозначению Elisa), метод хемилюминесценции [1], полимеразная цепная реакция (ПЦР) и ПЦР в реальном времени [5, 6].
Чаще всего для идентификации вируса используют реакцию иммунодиффузии ввиду ее высокой специфичности и низкой стоимости. Однако серологические методы диагностики имеют ряд недостатков. Это связано с тем, что в исследуемой пробе может присутствовать несколько штаммов одного и того же вида вируса и антисыворотка будет реагировать не на все штаммы, находящиеся в образце [1].
В своих опытах мы применяли метод ПЦР с использованием специфических праймеров.
Сложности правильной диагностики вирусных заболеваний связаны в первую очередь с неправильной транспортировкой и хранением погибших пчел до момента проведения анализа. Поэтому для обеспечения сохранности вирусных частиц в патологическом материале живых пчел перевозили в контейнерах с вентиляцией либо сохраняли пчел в замороженном виде (при –25°С).
Для профилактики возникновения на пасеке вируса мешотчатого расплода в весенний период проводили обработку семей пчел от клеща Varroa destructor, активного переносчика и резервуара вирусных частиц. Для чего использовали препарат фумисан, размещая его внутри ульев из расчета 1–2 полоски на 7–12 гнездовых рамок сроком до 40 дней.
При возникновении мешотчатого расплода, чтобы избежать дальнейшего распространения вируса в семье трансовариальным путем, при первой возможности заменяли матку на новую плодную и проводили перегон пчел в тщательно продезинфицированные ульи. Рамки с пораженным расплодом уничтожали.
Ульи для создания новых пчелиных семей дезинфицировали орошением 4%-ным раствором перекиси водорода из расчета 0,5 л/м2. Через 3 ч экспозиции их промывали водой, просушивали и через 5 ч использовали по назначению.
Соты опрыскивали с обеих сторон до полного заполнения ячеек 4%-ным раствором перекиси водорода (с экспозицией 3 ч). Дезинфицирующий раствор удаляли из ячеек путем встряхивания сотовых рамок. Затем их промывали водой и просушивали. Выбракованные соты перетапливали на воск.
Соты с пергой, предназначенные для подкормки пчел, полученные с неблагополучных по мешотчатому расплоду пасек, обеззараживали парами муравьиной кислоты.
Проведенный комплекс мероприятий позволил нам полностью ликвидировать вирус мешотчатого расплода на обследованных нами пасеках.
Р.Т.КЛОЧКО, С.Н.ЛУГАНСКИЙ, А.В.БЛИНОВ
Всероссийский научно-исследовательский институт
ветеринарной санитарии, гигиены и экологии —
филиал ФГБНУ «ФНЦ ВИЭВ РАН»
Проведенные нами исследования заболевших семей пчел показали, что доля вирусных заболеваний достигает 20%. Вирус мешотчатого расплода чаще поражает личинок в возрасте не более 2 дней. В течение зимы вирус сохраняется во взрослых пчелах, а весной наблюдается новая вспышка болезни. В своих опытах для диагностики мы применяли метод ПЦР с использованием специфических праймеров. При возникновении мешотчатого расплода, чтобы избежать дальнейшего распространения вируса в семье трансовариальным путем, при первой возможности заменяли матку на новую плодную и производили перегон пчел в тщательно продезинфицированные ульи. Проведенный комплекс мероприятий позволил нам полностью ликвидировать заболевание пчел вирусом мешотчатого расплода на обследованных нами пасеках.
Ключевые слова: пчелы, вирусы, мешотчатый расплод, метод ПЦР, диагностика.
ЛИТЕРАТУРА
1. Allen M., Ball B. The incidence and world distribution of honey bee viruses // Bee World. — 1996. 77:141-162.
2. Bailey L. The multiplication and spread of sacbrood virus of bees //Ann. Appl. Biol. — 1969. 63:483-491.
3. Bailey L. A strain of sacbrood virus from Apis cerana // J. Invertebr. Pathology. — 1982b. 39:264-265.
4. Bailey L., Gibbs A.J., Woods R.D. (1964). Sacbrood virus of the larval honey bee (Apis mellifera Linnaeus) // Virology — 1964. 23:425-429.
5. Grabensteiner E., Ritter W., Carter M.J., Davison S., Pechhacker H., Kolodziejek J., Boecking O., Derakhshifa I., Moosbeckhofer R., Licek E., Nowotny N. Sacbrood viruses of the honeybee (Apis mellifera). Rapid identification and phylogenetic analysis using reverse transcription // PC R Clin. Diagn. Lab. Immunol. — 2001. 8: 93-104.
6. Stolz C., Pradeilles-Duval R.M. Approches energetiques des discontinues mobiles en dynamique non lineaire // C.R. Acad. Sci. — Paris, 1996.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ:
Клочко Раиса Тимофеевна, канд. биол. наук, доцент, вед. науч. сотр., e-mail: rklochko@ ya.ru;
Луганский Сергей Николаевич, канд. биол. наук, вед. науч. сотр., e-mail:
Блинов Алексей Валерьевич, канд. вет. наук, ст. науч. сотр., e-mail:
SACBROOD VIRUS
R.T.Klochko, S.N.Luganskij, A.V.Blinov
Our studies have shown that of the number of diseased bee families affected by viral diseases is up to 20%. Sacbrood virus often infects larvae at the age of no more than 2 days. During the winter, the virus persists in adult bees, and in the spring a new outbreak of the disease is observed. In our experiments, we used the PCR method using specific primers. When sacbrood virus occurs, in order to avoid further spread of the virus in the family by the transovarial route, at the first opportunity, the queen bee was replaced by a new reproductive one and the bees were moved into carefully disinfected hives. The carried out complex of measures allowed us to eliminate the disease of bees with the sackbrood virus in the apiaries examined by us.
Keywords: honeybees, viruses, sacbrood, PCR method, diagnostics.
Адрес редакции журнала "Пчеловодство":
