УДК 577.12
Белковый обмен на разных стадиях развития насекомых сопровождается не только полным распадом белковых тел, но и ограниченным протеолизом (Филиппович и др., 1992; Takahashi, Yamamoto, 1993; Ribolla, Debianchi, 1995; Liu et al., 1996), что определяет время жизни и судьбу каждого конкретного белка и задает направление перестройке метаболизма, обеспечивая тем самым контроль не только белкового обмена во времени и в пространстве, но и обмена веществ в целом. Таким образом, превалирующий интерес к протеолитическим ферментам в последнее время обусловлен, прежде всего их ролью в регуляции обмена веществ [1, 5, 6].
В работе исследована активность двух протеолитических ферментов, относительно хорошо изученных по целому ряду параметров у некоторых видов животных: катепсина D и трипсиноподобного фермента [2–4, 6]. О действии их у личинок трутней информация практически отсутствует.
В качестве объекта исследования использовали личинок трутней в возрасте 1–7 суток. Динамика активности исследуемых ферментов в онтогенезе быстрорастущих и активно развивающихся организмов, по нашему мнению, — адекватный показатель для выяснения их роли в процессе метаморфоза.
В личинках трутней идентифицированы два фермента, обладающие протеолитической активностью со специфичностью действия катепсина D и трипсина. Установлены рН-оптимумы работы этих ферментов, изучены некоторые кинетические параметры и проведен их ингибиторный анализ. Показана динамика изменения активности исследуемых ферментов в зависимости от возраста личинок, что свидетельствует о вовлечении их в процессы онтогенеза.
М.Т.ГЕНГИН, Ж.В.ГРИШИНА
Пензенский государственный университет
Аннотация. Исследована активность катепсина D и трипсиноподобного фермента у личинок трутней разного возраста. Проведен кинетический анализ с целью подбора оптимальных условий для определения активности исследуемых ферментов. Установлена динамика изменения активности данных ферментов в онтогенезе личинок трутней. Обсуждается роль исследуемых ферментов в перестройке белков на разных стадиях личиночного развития трутней.
Ключевые слова: трутневый расплод, протеолитические ферменты, онтогенез.
ЛИТЕРАТУРА
1. Генгин М.Т. Особенности структурно-функциональной организации и физико-химические свойства нелизосомальных пептидгидролаз мозга животных: дис. ... д-ра биол. наук. — Пенза, 2002.
2. Иванов В.Г. Белковый комплекс и протеолитические ферменты желточного содержимого грены тутового шелкопряда Bombyx morí L.: дис. ... канд. биол. наук. — М., 1985.
3. Коновалов Ю.Д. Свойства, локализация, роль и возможные пути регуляции активности протеиназ и аминотрансфераз в раннем онтогенезе рыб // Успехи современной биологии. — 1986. — Т. 101. — № 3.
4. Немова H.H. Внутриклеточные протеолитические ферменты у рыб. — Петрозаводск: КНЦ РАН, 1996.
5. Хомутов А.Е., Пурсанов К.А., Перепелюк З.В. Регуляторные пептиды: учеб.-метод. пособие. — Н. Новгород: Изд-во ННГУ, 2014.
6. Ярыгин Д.В. Изучение комплекса протеолитических ферментов и их белковых ингибиторов в грене тутового шелкопряда: дис. … канд. биол. наук. — М., 2000.
7. Cho W.L., Tsao S.M., Hays A.R., Walter R., Chen J.S., Shigirevskaya E.S., Raikhel A.S. Mosquito cathepsin B-like protease involved in embryonic degradation of vitellin is produced as a latent extraovarian precursor // J. Biol. Chem. — 1999. — Vol. 274. — Iss. 19.
8. Lowry O.H., Rosebrought N.J., Farr A.G., Randall R.J. Protein measurement with the Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. — 1951. — Vol. 193. — № 1.
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ:
Генгин Михаил Трофимович, д-р биол. наук, проф. кафедры «Общая биология и биохимия», e-mail: Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript., тел. 8-927-360-21-17;
Гришина Жанна Валерьевна, аспирант кафедры «Общая биология и биохимия», e-mail: Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript., тел. 8-996-800-01-08.
RESEARCH OF ENZYMES ACTIVITY IN DRONE BROOD LARVAE AT DIFFERENT STAGES OF DEVELOPMENT
M.T.Gengin, Zh.W.Grishina
The activity of catepsin D and trypsin-like enzyme in drone brood larvae at different stages of development was researched. The kinetic analysis was applied to define the optimum conditions for enzymes activity identification. The dynamics of enzymes activity modification in drone brood larvae ontogeny was determined. The role of these enzymes in protein rearrangement at different stages of drone brood larva development is being discussed.
Keywords: drone brood larvae, proteolytic enzymes, ontogenesis.
Адрес редакции журнала "Пчеловодство":
