УДК 638.145.43
Методы оценки жизнеспособности сперматозоидов основаны на факте нарушения целостности наружной мембраны у клетки вскоре после ее гибели. Этот показатель может служить контролем точности оценки подвижности сперматозоидов, так как процент мертвых клеток не должен превышать процента неподвижных сперматозоидов.
Для дифференциации живых и мертвых клеток используют суправитальное окрашивание эозином, трипановой синью, а также флуоресцентные красители, проникающие в клетки. Световая микроскопия недостаточно отражает степень повреждения мембран сперматозоидов, в то время как флуоресцентная микроскопия выявляет сперматозоиды с поврежденной мембраной с более высокой точностью.
Проведен анализ состояния криобанка спермы трутней медоносных пчел породного типа «Приокский» среднерусской породы пчел. Оценка качества спермы после 5, 7 и 25 лет хранения в жидком азоте осуществлена методом флуоресцентной микроскопии и быстрого дифференциального окрашивания.
Все исследованные образцы обладали достаточно высокой жизнеспособностью сперматозоидов (71–93%). При оценке интактных и поврежденных сперматозоидов выявлены массовые деформации их головок (25–46%).
Ключевые слова: медоносная пчела, трутень, криоконсервация, жизнеспособность сперматозоидов.
1А.Н.ГУЛОВ, 2З.Н.САЙФУТДИНОВА,
1Е.О.ЛАРЬКИНА
1ФГБНУ «ФНЦ пчеловодства»;
2ФГБНУ «ФНЦ ВИЭВ им. К.И.Скрябина и Я.Р.Коваленко РАН»
ЛИТЕРАТУРА
1. Бородачев А.В., Кабашова О.В. Технология длительного хранения спермы трутней в жидком азоте. — ГНУ НИИП РАСХН, 2007.
2. Гулов А.Н. Воспроизводительные способности инструментально осемененных маток // Пчеловодство. — 2018. — № 4.
3. Кабашова О.В., Бородачев А.В., Какпаков В.Т. Репродукция пчелиных маток с использованием криоконсервированной спермы трутней Apis mellifera L. // сб. докл. науч.- практ. конф. — Дивово, 2004.
4. Никитина Е.В., Олексиевич Е.А., Шапиев И.Ш. Использование флуоресцентного метода для оценки качества спермы жеребцов // сб. докл. науч.-практ. конф. — ВНИИК, 2004.
5. Плосконос М.В. Применение эозина и йодистого пропидия для оценки жизнеспособности сперматозоидов человека // Клиническая лабораторная диагностика. — 2014. — № 11.
6. Collins A. M. A scientific note on the effect of centrifugation on pooled honey bee semen // Apidologie. — 2003. —V. 34. (doi: 10.1051/apido/2003030).
7. Gençer Н., Kahya Y., Woyke J. Why the viability of spermatozoa diminishes in the honeybee (Apis mellifera) within short time during natural mating and preparation for instrumental insemination // Apidologie. — 2014. — V. 45.
8. Locke S. J., Peng Y.S., Cross N. L. A supravital staining technique for honey bee spermatozoa // Physiological Entomology. — 1990. — V. 15. (doi: 10.1111/ j.1365-3032.1990.tb00506.x).
СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ:
Гулов Алексей Николаевич, науч. сотр., e-mail: Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript., тел. 8 (952) 124-16-64;
Сайфутдинова Зифа Низамовна, канд. биол. наук, вед. науч. сотр., e-mail: Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript., тел. 8 (903) 530-97-13;
Ларькина Елена Олеговна, e-mail: Адрес электронной почты защищен от спам-ботов. Для просмотра адреса в вашем браузере должен быть включен Javascript., тел. 8 (915) 616-06-02.
ANALYSIS OF CRYOPRESERVED DRONE SPERM
A.N.Gulov, Z.N.Sayfutdinova, E.O.Larkina
The analysis of the state of the сryobank of drone sperm of honeybees of breed type «Prioksky» of the Central Russian breed is carried out. Evaluation of sperm quality after 5, 7 and 25 years of storage in liquid nitrogen was carried out by fluorescence microscopy and rapid differential staining. All the studied samples had a sufficiently high sperm viability of 71–93 %. Mass deformations of spermatozoa heads (25–46%) were found in the process of evaluating intact and damaged spermatozoa.
Keywords: honey bee, drone, cryopreservation, viability of spermatozoa.
Адрес редакции журнала "Пчеловодство":
